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放射学检查是诊断强直性脊柱炎的关键。
因为所有强直性脊柱炎均有骶髂关节炎，且骶髂关节为本病最早受累部位，所以对怀疑有强直性脊柱炎者，应摄骨盆正位片。
骶髂关节的X线上可以表现为骶髂关节两侧的斑点状硬化、侵蚀、关节间隙狭窄，最后骶髂关节融合强直。
虽然骶髂关节病变发生早，而且是诊断的重要依据，但最为典型的X线表现是腰椎的竹节样病变，因此，腰椎的正、侧位片在这些病人不能省去。
当骶髂关节在平片上表现不明显时，CT、放射性核扫描、磁共振等影像学检查对疾病的早期诊断会提供很大帮助。
需提醒病人注意的是：在做骶髂关节X线检查前一天的晚间应服用导泻剂，在晨起排便后再拍片，以保证X线片的清晰度。
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强直性脊柱炎的血液化验常无特异性改变。虽然90％以上病人血清中HLA—B27阳性，但也只能作为诊断的参考。疾病活动期的病人大多血沉增快，半数以上的病人血清C反应蛋白增高和免疫球蛋白升高，因此可用作辅助指标来监测疾病的活动程度。
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